РЕЗЮМЕ Обоснование: Эстеразы феруловой кислоты (FAE, КФ 3.1.1.73), известные также как ферулоилэстеразы, эстеразы коричной кислоты или циннамоилэстеразы, принадлежат к общей группе гидролаз, распространённых в царстве растений.Ранее были особеннохорошо охарактеризованы ферменты грибов, тогда как в молочнокислых бактериях (LAB) этот фермент обнаруживался редко. Хорошо известно, что свободные фенольные кислоты, являющиеся сильными антиоксидантами, могут быть выделены из пищевых волокон под действием кишечной микрофлоры, в состав которой входят также молочнокислые бактерии. Целью данного исследования было изучение способности четырёх штаммов LAB (L. acidophilusK1, L. rhamnosusE/N, PEN, OXY) продуцировать внеклеточные FAE на различных синтетических и природных источниках углерода.
Материал и методы: Штаммы LAB культивировали в среде минимального роста при использовании отрубей Немецкой пшеницы и ржи, барды, изолированного из древесины лиственницы арабиногалактана, яблочного и кукурузного пектинов, метилферулата, метил-p-кумарата, метиловых эфиров сиреневой или ванилиновой кислот, использованных в качестве источников углерода. Активность FAE определяли в надосадочной жидкости, полученной после культивирования, с использованием метилферулата и высокоэффективной жидкостной хроматографии с ультрафиолетовой детекцией.
Результаты: Наиболее высокая активность FAE была получена у L.acidophilusK1 при использовании метилферулата (макс. 23.34±0.05 единиц активности) and метил- p-кумарата (макс. 14.96±0.47 единиц активности) в качестве источников углерода. L. rhamnosusE/N, OXY и PEN проявили ограниченную способность продуцировать FAE для расщепления метиловых эфиров коричных кислот. Метиловые эфиры сиреневой и ванилиновой кислот (MS and MV) были недостаточными источниками углерода для образования FAE. Барда оказалась наиболее подходящим субстратом для синтеза FAE культурами L. acidophilus K1 (макс. 2.64±0.06 единиц активности) и L. rhamnosus E/N, OXY и PEN. FAE также успешно индуцировалась природными субстратами: ржаными отрубями, кукурузным пектином (L. acidophilus K1), отрубями немецкой пшеницы и арабиногалактаном лиственницы (E/N, PEN) или отрубями немецкой пшеницы и кукурузным пектином (OXY).
Заключение: Данное исследование доказало способность культур Lactobacillus продуцировать FAE в присутствии широкого ряда сложноэфирных субстратов. Наиболее высокая ферментативная активность получена в присутствии синтетических метиловых эфиров фенольных кислот, что подтверждает принудительное образование FAE бактериями, тогда как в присутствии природных субстратов использовались другие источники углерода. FAE относится к ферментам, имеющим второстепенное значение в переваривании пищи и кишечном всасывании, но в дальнейшем они должны быть охарактеризованы.